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标准品的制备方法有哪些?

2021-09-23 17:07:47

  标准品的制备:标准品的制备是一个非常复杂的问题,也是标记免疫分析中比较难制备的成分。以下博林达讨论了实验室标准品(或商业试剂中的标准品)的制备。

 

  基质制备:如上所述,标准品的介质(基质)组成应与供试品相同。对于大多数用于测定血清中某种物质的标准品,采用不含待测物质的零血清来制备反应介质环境。但有时零值血清的制备是很困难的,所以有些标准品用适当的缓冲液配制,并在缓冲液中加入一定量的载体蛋白(通常为1%~2%牛血清白蛋白)使其成为类似于样品的介质环境。

 

  零值血清的制备方法有:

  吸附法:血清中的小分子物质,如三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)等,可用活性炭吸附去除。这种方法简单,但被测物质去除困难,不能用这种方法制备大分子活性物质。

 

  反复冻融法:大分子活性物质可用低值血清,反复冻融使受试物失活。这样可以灭活大部分蛋白质激素,但也很难获得真正的零值血清。

 

  亲和层析法:用特异性抗体制备亲和层析柱吸附待测抗原。该方法可用于获得高质量的零值血清,但该方法较为复杂且成本较高。

 

  标准物纯品的选择:应选择化学纯度高、免疫纯度高的纯品作为标准品。其中,免疫纯度尤为重要,标准品中不应含有与被测物质发生交叉反应的物质。

 

  标准品的制备:先用零值血清制备高浓度标准品,然后按照实验系统的要求,将高值血清用零值血清稀释至所需浓度,使其达到预定的浓度,要求并由不同浓度的系列标准品组成。


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